如何构建某一个基因的原核表达载体

构建表达载体首先取决于你的实验目的,例如你的实验是否要求你的蛋白表达出来必须可溶性蛋白,载体上面的标签决定了你的纯化方法,当然也决定了实验成本,等等一系列需求.
拿带标签的载体为例,因为带标签后可以增加蛋白质的可溶性,也为纯化带来了方便,一般都会采用.标签一般都是在目的蛋白的N端,这样就需要考虑读码框的问题,一定要与前面的读码框保持一致.
利用酶切连接的方法连入目的载体这个应该都知道,或者用gateway系统,非常方便,我就经常用gateway载体,构建起来速度呼呼的.
基本就是这些了吧,主要就考虑选择什么标签和读码框别错了.
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